Nøgleforskellen mellem pBR322 og pUC19 er, at pBR322 er en plasmidvektor, der er 4361 basepar lang, mens pUC19 er en plasmidvektor, der er 2686 basepar lang.
En kloningsvektor er et lille stykke DNA, der kan opretholdes stabilt i en organisme. Det er også et lille stykke DNA, hvori et fremmed DNA-fragment kan indsættes til kloningsformål. En vektor indeholder vigtige egenskaber, der muliggør bekvem insertion af et fremmed DNA-fragment i vektorer, såsom restriktionssteder, en selekterbar markør, reportergen og ekspressionselement. Kloning blev først udført ved hjælp af E.coli. Kloningsvektorer for E. coli indbefatter plasmider, bakteriofager, cosmider og bakterielle kunstige kromosomer (BAC). De mest almindeligt anvendte vektorer er gensplejsede plasmider. pBR322 og pUC19 er to typer plasmidvektorer.
Hvad er pBR322?
pBR322 er en plasmidvektor. Det er en af de første meget anvendte kloningsvektorer for E. coli. Denne vektor blev først skabt i 1977 i Herbert Boyers laboratorium ved University of California, San Francisco. Det er et cirkulært dobbeltstrenget DNA, der er 4361 basepar langt.
Figur 01: pBR322
Denne plasmidvektor har specielle funktioner. Norm alt har den to antibiotikaresistensgener: genet bla, der koder for ampicillinresistens (AmpR) proteinet og genet tetA, der koder for tetracyklinresistensen (TetR) protein. Desuden indeholder det oprindelsen af replikationen af pMB1. Denne plasmidvektor har også rop-gen, der koder for en restriktor af plasmidkopinummer. Desuden har denne vektor unikke restriktionssteder for mere end 40 restriktionsenzymer. Elleve af disse fyrre restriktionssteder ligger inden for TetR genet. Der er to restriktionssteder for restriktionsenzymer HindIII og Clal i promotoren af TetR -genet. Desuden er der seks meget vigtige restriktionssteder i AmpR genet. pBR322 er en kloningsvektor med lavt kopiantal. Det giver cirka 20 plasmidkopier pr. bakteriecelle. Vektorens molekylvægt er 2,83×106 d altons.
Hvad er pUC19?
pUC19 er en plasmidvektor, der er 2686 basepar lang. Det er en af rækken af plasmidvektorer skabt af Joachim Messing og kolleger. Det tidlige arbejde med denne plasmidserie blev udført ved University of California. Det er et cirkulært dobbeltstrenget DNA.
Figur 02: pUC19
Denne plasmidvektor indeholder også vigtige funktioner. Det har et N-termin alt fragment af β-glactosidase (lacz) gen. Den har også en region med flere kloningssteder (MCS). Denne region er opdelt i codon 6 og 7 af lacz-genet. MCS-regionen tilvejebringer mange restriktionsendonuklease-restriktionssteder. Ud over β-glactosidasegenet koder pUC19 også for et ampicillinresistensgen (AmpR). Desuden er replikationsstartstedet afledt af plasmid pMB1. Selvom pUC19 er lille i størrelse, har det et højt kopiantal (500-700 kopier pr. bakteriecelle). Molekylvægten af denne plasmidvektor er 1,75×106 d altons.
Hvad er lighederne mellem pBR322 og pUC19?
- pBR322 og pUC19 er to typer plasmidvektorer.
- De er populære kloningsvektorer til coli.
- Begge plasmidvektorer har samme replikationsorigin som plasmid pMB1.
- Disse vektorer har flere begrænsningswebsteder.
- Begge plasmidvektorer har et ampicillinresistensgen som en selekterbar markør.
Hvad er forskellen mellem pBR322 og pUC19?
pBR322 er en plasmidvektor, der er 4361 basepar lang, mens pUC19 er en plasmidvektor, der er 2686 basepar lang. Dette er således den vigtigste forskel mellem pBR322 og pUC19. Endvidere er pBR322 en plasmidvektor med lavt kopiantal, mens pUC19 er en plasmidvektor med højt kopiantal.
Nedenstående infografik præsenterer forskellene mellem pBR322 og pUC19 i tabelform til sammenligning side om side.
Oversigt – pBR322 vs pUC19
De mest almindeligt anvendte kloningsvektorer til E.coli er gensplejsede plasmider.pBR322 og pUC19 er to typer plasmidvektorer. pBR322 er en plasmidvektor, der er 4361 basepar lang, mens pUC19 er en plasmidvektor, der er 2686 basepar lang. Så dette er den vigtigste forskel mellem pBR322 og pUC19.
