Nøgleforskellen mellem HEK293 og HEK293t er, at HEK293 er en udødeliggjort cellelinje afledt af den embryonale humane nyre, der er transficeret med afklippet humant adenovirus type 5DNA, mens HEK293t er en dattercellelinje afledt af den oprindelige HEK293-cellelinje, der er transficeret med en plasmidvektor, der bærer SV40-replikationsstartstedet.
Transfektion defineres norm alt som processen med at introducere fremmed DNA og RNA i celler for at påvirke deres genotype og fænotype. Sådanne introduktioner af fremmede nukleinsyrer gennem forskellige biologiske, kemiske og fysiske metoder kan ændre cellens egenskaber. I sidste ende tillader dette studiet af genfunktion og proteinekspression i cellens sammenhæng. HEK293 og HEK293t er to cellelinjer, der har været flittigt brugt i cellebiologi i mange år på grund af deres tilbøjelighed til transfektion.
Hvad er HEK293?
HEK293 er en udødeliggjort cellelinje afledt af den embryonale humane nyre, som er transficeret med afklippet humant adenovirus type 5DNA for at producere mange rekombinante proteiner. HEK293'er blev oprindeligt isoleret fra humane nyreceller af den hollandske biolog Alex Van der Eb i 1973. Disse celler blev dyrket i vævskultur fra et kvindeligt foster. Senere blev de transficeret med afklippet humant adenovirus type 5DNA af Frank Graham, en postdoktor i Van der Ebs laboratorium. Denne cellelinje fik navnet HEK293, fordi det var Franks 293rd eksperiment.
Figur 01: HEK293
Inkorporeringen af adenovirale gener i HEK-cellegenomet gør det muligt for disse celler at producere en høj mængde rekombinante proteiner meget effektivt. Desuden indeholder den adenovirale vektor CMV-promotorregionen; derfor øger det denne effektivitet yderligere. Denne cellelinje er blevet brugt som vært til genekspressionsundersøgelser. Denne cellelinje bruges også af den bioteknologiske industri til at producere terapeutiske proteiner til genterapi.
Hvad er HEK293t?
HEK293t er en dattercellelinje afledt af den oprindelige HEK293-cellelinje, som er transficeret med en plasmidvektor, der bærer SV40-replikationsstartstedet for at producere en høj mængde rekombinante proteiner. HEK293t er en human cellelinje, der udtrykker en mutant version af SV40 store T-antigenet. HEK293t blev skabt i Michele Carlos' laboratorium i Stanford gennem den stabile transfektion af HEK29E-cellelinjen med et plasmid, der koder for en temperaturfølsom mutant af SV40 store T-antigenet. Det blev oprindeligt omt alt som 293/tsA1609neo. Dette skyldes, at transfektionen blev brugt til at skabe en cellelinje, der bibringer neomycinresistens og ekspression af tsA 1609-allelen af SV40 large T-antigen.
Figur 02: HEK293t
På grund af ekspressionen af en mutant version af SV40 stort T-antigen kan de transficerede plasmider med SV 40-replikationsorigin i høj grad øge mængden af rekombinant protein. Denne cellelinje er almindeligt anvendt i den bioteknologiske industri til proteinekspression og produktion af rekombinante retrovira.
Hvad er lighederne mellem HEK293 og HEK293t?
- HEK293 og HEK293t er to cellelinjer, der er blevet flittigt brugt i cellebiologiske forskning på grund af deres tilbøjelighed til transfektion.
- Begge cellelinjer er laboratorieafledte.
- Disse cellelinjer kan i høj grad øge mængden af rekombinant proteinproduktion.
- De er lavet ved at transficere embryonale humane nyreceller med en plasmidvektor.
Hvad er forskellen mellem HEK293 og HEK293t?
HEK293 er en udødeliggjort cellelinje afledt af den embryonale humane nyre, som er transficeret med forskåret humant adenovirus type 5DNA. I modsætning hertil er HEK293t en dattercellelinje afledt af den oprindelige HEK293-cellelinje, som er transficeret med en plasmidvektor, der bærer SV40-replikationsstartstedet. Så dette er den vigtigste forskel mellem HEK293 og HEK293t. Ydermere udtrykker HEK293 ikke den mutante version af SV40 store T-antigenet. På den anden side udtrykker HEK293t mutantversionen af SV40 large T-antigenet.
Den følgende infografik viser forskellene mellem HEK293 og HEK293t i tabelform til sammenligning side om side.
Oversigt – HEK293 vs HEK293t
HEK293 og HEK293t er to cellelinjer, der er blevet flittigt brugt i cellebiologiske forskning på grund af deres konstante vækst og tilbøjelighed til transfektion. HEK293 er en udødeliggjort cellelinje afledt af en embryonal human nyre, der er transficeret med forskåret human adenovirus type 5DNA, mens HEK293t er en dattercellelinje afledt af HEK293 original cellelinje, der er transficeret med en plasmidvektor, der bærer SV40 replikationsstartstedet. Dette opsummerer således forskellen mellem HEK293 og HEK293t.
