Nøgleforskel – primær cellekultur vs cellelinje
Forskningsfeltet har taget en stor drejning med introduktionen af celledyrkning og brugen af cellelinjer til forskning. Forskellige tests udføres på kunstigt fremstillede celler og cellelinjer for at vurdere cellens adfærd. Det meste menneskebaseret forskning kræver celledyrkning og cellelinjer for at validere resultaterne, især når forskningsundersøgelserne er baseret på farmakologi og lægemiddelopdagelse. Primær cellekultur er en kultur fremstillet ved direkte isolering af celler via mekaniske eller enzymatiske metoder. En cellelinje fremstilles ved kontinuerlig passage af en primær cellekultur for at opnå en cellelinje, der har erhvervet homologe karakterer. Den vigtigste forskel mellem den primære cellekultur og cellelinjen er antallet af passage gange, hver af dem har. Den primære cellekultur isoleres direkte, hvorimod en cellelinje fremstilles ved at passere en primær cellekultur flere gange.
Hvad er en primær cellekultur?
Primær cellekultur er et cellekulturpræparat ved at isolere celler direkte fra kilden via mekaniske eller enzymatiske metoder. Cellerne isoleres ved trypsinisering eller ikke-trypsiniseringsmetoder. De primære cellekulturer dyrkes i egnede vækstmedier, der indeholder vækstfaktorer, hormoner, lipider og andre udefinerede komponenter. Visse medier skal ledsages af serum. Medierne sikrer, at vækstbetingelserne er optimeret, og cellerne overlever under optimale forhold. Celler kan isoleres fra forskellige vævskilder såsom levervæv, endotel og neur alt væv hos mennesker eller højere dyr via trypsinisering.
Ved isolering af celler fra planter og mikroorganismer anvendes specielle ekstraktionsprocedurer, som anvender både mekaniske og kemiske metoder. Disse isolerede celler kan immobiliseres på et fast underlag eller kan passeres i flere generationer for at blive udviklet til en cellelinje.
Primære cellekulturer er hovedsageligt af to typer; Adhærente cellekulturer og suspensionscellekulturer. Adhærente primære cellekulturer er forankringsafhængige, og de kræver solid støtte til væksten. De adhærente primære cellekulturer stammer hovedsageligt fra væv eller organer. Suspensionens primære cellekulturer er forankringsuafhængige, og de vokser i flydende medier. Suspensionskulturerne skal omrøres kontinuerligt under vækstfasen. Suspensionens primære cellekulturer kan afledes direkte fra blod.
Primære cellekulturer har en relativt kortere levetid, men informationen fra primære cellekulturer under in vitro-betingelser udgør det grundlæggende grundlag for mange undersøgelser. De er nyttige til at studere cellekarakteristika, både morfologisk og kemisk adfærd.
Hvad er en mobillinje?
Cellelinjer er meget udbredt i forskning, og i øjeblikket er cellelinjer såsom cancercellelinjer, levercellelinjer og nyrecellelinjer kommercielt tilgængelige til forskningsformål. Cellelinjerne fremstilles ved kontinuerlig passage af primær cellekultur. Passage refererer til subkulturprocessen, hvor cellekulturerne udvikles til en cellelinje. Disse cellelinjer er kulturer i en todimensionel eller tredimensionel matrix og vedligeholdt som cellelinjer.
Cellelinjer er klassificeret som endelige og kontinuerlige cellelinjer. Finite cellelinjer udsættes for et bestemt antal passager (20 – 30 passager). Efter afslutning af det nødvendige antal passager går cellelinjen ind i et alderdomsstadium. Disse celler er nemme at håndtere, da deres vækst er bestemt. De kontinuerlige cellelinjer omtales også som udødeliggjorte cellelinjer. Disse cellelinjer har ikke et bestemt antal passager. De vokser i det uendelige og er således i stand til at erhverve mutationer. Kontinuerlige cellelinjer muteres derfor let, og de ændrer sig således i deres morfologiske og genetiske karakteristika, i modsætning til i endelige cellelinjer.
Figur 01: Cellelinje
Cellelinjer bruges, da det er mere bekvemt end at bruge en primær cellekultur, da det kan bruges igen og igen i en vis periode. Men den er mere tilbøjelig til mutationer og forurening, da deres spredning øges.
Hvad er lighederne mellem primær cellekultur og cellelinje?
- Både cellekultur- og cellelinjetyper bruges i forskning til at studere en celles morfologiske, kemiske og genetiske karakteristika.
- Både cellekultur- og cellelinjetyper udvindes ved mekaniske og enzymatiske metoder.
- Både cellekultur- og cellelinjetyper kræver vækstmedier og specifikke vækstbetingelser.
- Både cellekultur- og cellelinjetyper er tilbøjelige til mutationer.
Hvad er forskellen mellem primær cellekultur og cellelinje?
Primær cellekultur vs cellelinje |
|
| En primær cellekultur er en kultur fremstillet ved direkte isolering af celler ved hjælp af mekaniske eller enzymatiske metoder. | En cellelinje fremstilles ved kontinuerlig passage af en primær cellekultur for at opnå en cellelinje, der har erhvervet homologe karakterer. |
| Antal passager | |
| Primære cellekulturer passeres ikke, cellerne opretholdes under dyrkningsbetingelser. | Celler passeres definitivt eller uendeligt ved fremstilling af cellelinjer. |
| Typer | |
| Adhærent primær cellekultur og Suspension primær cellekultur er to typer primære cellekulturer. | Finite cellelinje og kontinuerlig cellelinje er to typer cellelinjer. |
| Levetid | |
| Primære cellekulturer har en kort levetid. | Mobilelinjer har en længere levetid. |
Opsummering – Primær cellekultur vs cellelinje
Primære cellekulturer og cellelinjer bruges i vid udstrækning i forskning til at studere adfærdsmønstre for forskellige celler under forskellige forhold og under forskellige farmakologiske aspekter. Primære cellekulturer isoleres direkte fra kildeorganet eller vævet og dyrkes på et dyrkningsmedium. Betingelserne er optimeret til væksten af de specifikke celler. Cellelinjer derimod fremstilles ved at passere de primære cellekulturer et begrænset eller uendeligt antal gange. Cellelinjer er kommercielt tilgængelige og er populære blandt forskere på grund af den lette brug.
