Nøgleforskel – TLC vs HPTLC
TLC og HPTLC er to kemiske teknikker, der bruges til at adskille ikke-flygtige komponenter i en blanding. Den vigtigste forskel mellem TLC og HPTLC er, at det absorberende materiale i TLC-pladen har store partikler, mens HPTLC-pladerne har meget små partikler af adsorberende materiale.
TLC er tyndtlagskromatografi. HPTLC er højtydende tyndtlagskromatografi, som er en avanceret teknik sammenlignet med TLC-metoden.
Hvad er TLC?
TLC eller tyndtlagskromatografi er en grundlæggende kemisk teknik, der bruges til at adskille ikke-flygtige komponenter i en blanding. Dette eksperiment udføres ved hjælp af plader af glas, plastik eller papir. Dette ark er belagt med et tyndt lag cellulose eller silicagel (et adsorberende materiale). Dette tynde lag er kendt som den stationære fase af TLC. Arket er kendt som TLC-pladen.
Før eksperimentet er en basislinje og en toplinje markeret med en blyant på TLC-pladen. Derefter spottes prøven langs denne linje ved hjælp af et kapillarrør. Derefter placeres TLC-pladen lodret i en mobil fase. Den mobile fase er et opløsningsmiddel (eller en blanding af opløsningsmidler) placeret i en beholder. Når man placerer TLC-pladen i denne mobile fase, bør man holde basislinjen over opløsningsmidlets margin. Ellers vil prøven blive opløst i opløsningsmidlet.
TLC-plade får lov til at blive i den mobile fase i nogen tid. Derefter, med tiden, stiger den mobile fase opad pladen på grund af kapillærvirkning. Hvis prøven er opløselig i den mobile fase, vil den stige opad sammen med den mobile fase.
Princippet "like opløser ligesom" ligger bag denne TLC-metode. Dette betyder, at polære forbindelser opløses i polære opløsningsmidler, mens ikke-polære forbindelser opløses i upolære opløsningsmidler. Den stationære fase er norm alt silicagel eller cellulose, som er en polær forbindelse. Den anvendte mobile fase er et ikke-polært opløsningsmiddel, såsom hexan. Derfor, hvis prøven indeholder nogen ikke-polære komponenter, vil disse komponenter migrere opad sammen med den mobile fase. Polarkomponenter klæber til pladen. Blandt de bevægelige komponenter vil moderat upolære forbindelser migrere langsomt, mens meget upolære forbindelser vil migrere hurtigt. Når opløsningsmiddelfronten har nået toplinjen på TLC-pladen, tages pladen ud og lader tørre.
Figur 01: TLC-teknik
Hvis komponenterne i prøven var farvede forbindelser, skulle der være farverige pletter på pladen forskellige steder. Men hvis komponenterne var farveløse, skulle nogle andre teknikker bruges; for eksempel sprøjtning af ninhydrin for at påvise ammoniak eller aminer (primære aminer og sekundære aminer).
Hvad er HPTLC?
HPTLC eller højtydende tyndtlagskromatografi er den avancerede form for tyndtlagskromatografi (TLC). Opløsningen og nøjagtigheden af HPTLC er meget høj. De fleste trin i denne teknik kan automatiseres.
Pladerne, der bruges i HPTLC, indeholder silicagelpartikler med en meget lille størrelse, og pakningstætheden af gelen på pladen er høj. Pladens overflade er glat og giver en effektiv adskillelse. Analysen er hurtigere end TLC-teknikken. Følsomheden af denne metode er også høj. I HPTLC kan flere forskellige prøver adskilles i den samme plade uden prøveforberedelsestrin.
Hvad er forskellen mellem TLC og HPTLC?
TLC vs. HPTLC |
|
| TLC er tyndtlagskromatografi. | HPTLC er højtydende tyndtlagskromatografi. |
| Teknik | |
| Det er en grundlæggende kemisk teknik, der bruges til at adskille ikke-flygtige komponenter i en blanding. | Det er den avancerede form for tyndtlagskromatografi (TLC). |
| Plade | |
| TLC-plade kan være lavet af papir, plast eller glas, som påføres et adsorberende materiale med store partikler. | HPTLC-plader har meget små partikler af adsorberende materiale. |
| Opløsning | |
| TLC-metoden giver dårlig opløsning, når prøven har komponenter med lignende egenskaber. | HPTLC-metoden giver en høj opløsning. |
| Tid | |
| TLC-teknik er en tidskrævende teknik. | HPTLC giver resultater ved en højere hastighed end TLC-metoden. |
Oversigt – TLC vs HPTLC
HPTLC er den avancerede form for TLC. Den vigtigste forskel mellem TLC og HPTLC er, at TLC-pladen kan være lavet af papir, plast eller glas, som påføres et adsorberende materiale med store partikler, hvorimod HPTLC-plader har meget små partikler af adsorberende materiale.
