Nøgleforskellen mellem ionbytnings- og størrelsesudelukkelseskromatografi er, at ionbytningskromatografi bruges til at analysere ioniske stoffer i henhold til ladningen, mens størrelsesudelukkelseskromatografi bruges til at analysere store molekyler i henhold til størrelsen.
Kromatografi er en analytisk teknik, der kan bruges til at analysere forskellige blandinger. De kromatografiske teknikker er navngivet efter den parameter, der bruges til at analysere stofferne – f.eks. størrelsesudelukkelseskromatografi, ionbytningskromatografi osv.
Hvad er ionbytningskromatografi?
Ionbytterkromatografi er en analytisk teknik, hvor vi kan analysere ioniske stoffer. Det er ofte nyttigt at analysere uorganiske anioner og kationer (dvs. chlorid- og nitratanioner og kalium-, natriumkationer). Selvom det ikke er en meget almindelig metode, kan vi analysere organiske ioner ved hjælp af den. Desuden kan vi bruge denne teknik til oprensning af proteiner, fordi proteiner er ladede molekyler ved bestemte pH-værdier. Her bruger vi en fast stationær fase, som de ladede partikler kan binde sig til. For eksempel kan vi bruge harpiksen polystyren-divinylbenzen copolymerer som fast bærer.
Figur 01: Teori bag ionbytningskromatografi
For at forklare dette yderligere har den stationære fase fikserede ioner såsom sulfatanioner eller kvaternære aminkationer. Hver af disse bør forbindes med en modion (en ion med modsat ladning), hvis vi skal bevare neutraliteten i dette system. Hvis modionen er en kation, så kalder vi systemet som en kationbytterharpiks. Men hvis modionen er en anion, er systemet en anionbytterharpiks. Desuden er der fem store trin i ionbytningskromatografi:
- Indledende fase
- Adsorption af målet
- Start af eluering
- Afslutning på eluering
- Regeneration
Hvad er størrelsesekskluderingskromatografi?
Størrelsesudelukkelseskromatografi eller SEC er en analytisk teknik, hvor molekyler i en blanding kan adskilles efter deres størrelse og molekylvægt. Norm alt fungerer det med store molekyler kaldet makromolekyler. Typisk anvendes en vandig opløsning til analysen. Så kaldes det gelfiltreringskromatografi. Når et organisk opløsningsmiddel kaldes det gelpermeationskromatografi.
Gelfiltreringskromatografi er en form for størrelsesudelukkelseskromatografi, hvor vi bruger en vandig opløsning som den mobile fase. Derfor er den mobile fase, vi ofte bruger i denne teknik, en vandig buffer. Vi bruger også en kromatografisk kolonne til denne adskillelse, og vi skal pakke kolonnen med porøse perler. Norm alt er Sephadex og agarose nyttige som det porøse materiale. Derfor er disse materialer den stationære fase af vores eksperiment. Desuden kan vi bruge porestørrelsen af disse perler til at bestemme størrelsen af makromolekyler, som vi adskiller. Det er dog kun et skøn.
Figur 02: Et apparat til størrelsesudelukkelseskromatografi
Gelpermeationskromatografi er en form for størrelsesudelukkelseskromatografi, hvor vi bruger et organisk opløsningsmiddel som den mobile fase. Derfor kan vi bruge løsninger som hexan og toluen til dette formål. Den stationære fase er et porøst materiale, det samme som ved gelfiltreringskromatografi. Denne teknik anvendes ofte på polymerer og andre organisk opløselige materialer. Teknikkens virkemåde svarer til gelfiltreringskromatografi.
Hvad er forskellen mellem ionbytning og størrelsesudelukkelseskromatografi?
Kromatografi er en analytisk teknik, der kan bruges til at analysere forskellige blandinger. Den vigtigste forskel mellem ionbytnings- og størrelsesudelukkelseskromatografi er, at ionbytterkromatografi bruges til at analysere ioniske stoffer i henhold til ladningen, mens størrelsesudelukkelseskromatografi bruges til at analysere store molekyler i henhold til størrelsen.
Infografikken nedenfor giver flere oplysninger om forskellen mellem ionbytnings- og størrelsesudelukkelseskromatografi.
Opsummering – Ionbytning vs størrelsesudelukkelseskromatografi
Kromatografi er en analytisk teknik, der kan bruges til at analysere forskellige blandinger. Den vigtigste forskel mellem ionbytnings- og størrelsesudelukkelseskromatografi er, at ionbytterkromatografi bruges til at analysere ioniske stoffer i henhold til ladningen, mens størrelsesudelukkelseskromatografi bruges til at analysere store molekyler i henhold til størrelsen.
