Nøgleforskellen mellem excitations- og emissionsfilter er, at excitationsfilteret er vigtigt for at gøre objektet lysere under mikroskopets undersøgelse, mens emissionsfilteret er vigtigt for at holde objektets omgivelser så mørkt som muligt.
Begreberne excitations- og emissionsfiltre bruges hovedsageligt vedrørende fluorescensmikroskopi, der opererer baseret på optiske filtre. Der er tre komponenter i et typisk fluorescensmikroskopisk instrument: excitationsfilter, dikroisk strålesplitter og emissionsfilter.
Hvad er et excitationsfilter?
Et excitationsfilter er en type optisk glasfilter, der er nyttig ved valg af lysets excitationsbølgelængde. Norm alt er det et optisk glas af høj kvalitet, der er meget udbredt i fluorescensmikroskopi og spektroskopiske applikationer, hvor vi skal vælge en bølgelængde fra en lysstråle, der kommer fra en lyskilde.
For det meste har excitationsfiltre en tendens til at vælge lys med en kort bølgelængde, der kommer fra en excitationslyskilde. Dette skyldes, at denne type lys kan bære energi, der kun er tilstrækkelig til fluorescering af et objekt, der undersøges under mikroskop.
Figur 01: Undersøgelse under et mikroskop i nærvær af fluorescens
Der er to hovedtyper af excitationsfilterglas som kortpasfilterglas og båndpasfilterglas. Disse to typer filterglas adskiller sig fra hinanden i form af notch-filtre eller dybt blokerende filtre, der bruges som emissionsfilterglas. Der kan dog også være nogle andre typer excitationsfilterglas, såsom monokromatorer, kileprismer, der er koblet med en smal sp alte, og holografiske diffraktionsgitre.
Almindeligvis kommer et excitationsfilterglas i en pakke med et emissionsfilter og en dikroisk stråledeler i en terning. Derfor kan vi indsætte disse to glas sammen som en kombination i mikroskopet. Den dikroiske stråle har en tendens til at styre bølgelængden af lyset, der kommer ind i hvert filterglas.
Hvad er et emissionsfilter?
Et emissionsfilter er en type optisk glas, der tillader de bølgelængder, der udsendes af fluoroforen, at passere gennem det. Dette optiske glas kaldes også et emitter- eller barrierefilter. Det kaldes et barrierefilter, fordi det kan blokere alt det uønskede lys uden for båndet af excitationsenergi, der kommer fra excitationslyset. Dette barrierefilter gør, at baggrunden for objektet, der undersøges fra et mikroskop, er den mørkeste som muligt.
Sædvanligvis leveres et emissionsfilterglas i en pakke med et excitationsfilter og en dikroisk stråledeler i en terning. Derfor kan vi indsætte disse to glas sammen som en kombination i mikroskopet. Der har den dikroiske stråle en tendens til at styre bølgelængden af lyset, der kommer ind i hvert filterglas.
Hvad er forskellen mellem excitations- og emissionsfilter?
Der er tre komponenter i et typisk fluorescensmikroskopisk instrument, der inkluderer et excitationsfilter, dikroisk strålesplitter og et emissionsfilter. Den vigtigste forskel mellem excitations- og emissionsfilter er, at excitationsfilteret er vigtigt for at lette genstanden op under undersøgelse af mikroskop, mens emissionsfilteret er vigtigt for at holde objektets omgivelser så mørkt som muligt.
Nedenstående infografik opsummerer forskellene mellem excitations- og emissionsfilter i tabelform.
Opsummering – Excitation vs Emission Filter
Nøgleforskellen mellem excitations- og emissionsfilter er, at excitationsfilteret er vigtigt for at gøre objektet lysere under mikroskopets undersøgelse, mens emissionsfilteret er vigtigt for at holde objektets omgivelser så mørkt som muligt.
