Nøgleforskellen mellem differential- og densitetsgradientcentrifugering er, at differentialcentrifugering adskiller partikler i en blanding baseret på partiklernes størrelse, mens densitetsgradientcentrifugering adskiller partikler i en blanding baseret på partiklernes densitet.
Centrifugering er en separationsmetode af forskellige komponenter i en analytblanding. Denne metode involverer rotation af prøven omkring en fast akse, hvilket forårsager produktionen af en centrifugalkraft. Centrifugalkraften får partiklerne i prøven til at bevæge sig ned gennem et flydende medium. Denne proces forårsager sedimentering af partikler eller celler med forskellige størrelser og tætheder med forskellige hastigheder.
Hvad er differentiel centrifugering?
Differentiel centrifugering er en analytisk teknik, hvor vi kan separere partiklerne i en blanding afhængigt af størrelsen af partiklen. Det er den enkleste form for centrifugering og kaldes også differentiel pelletering. Denne metode er vigtig for at adskille komponenterne i en celle. Partikler med forskellige størrelser undergår sedimentering med forskellige hastigheder ved centrifugeringen. Med andre ord sedimenterer store partikler hurtigere end mindre partikler. Desuden kan sedimentationshastigheden øges ved at øge centrifugalkraften.
Når man overvejer dets anvendelser, er differentiel centrifugering nyttig til at høste celler eller producere rå subcellulære fraktioner fra et vævshomogenat. For eksempel. et leverhomogenat indeholder kerner, mitokondrier, lysosomer og membranvesikler. Hvis vi centrifugerer dette homogenat ved lav hastighed og i kort tid, kan vi få de store kerner som pellet. Hvis vi bruger høj centrifugalkraft, så kan vi få mitokondrier i pillen. Biologiske prøver er dog altid tilbøjelige til forurening.
Hvad er tæthedsgradientcentrifugering?
Densitetsgradientcentrifugering er en analytisk teknik, hvor vi kan adskille partiklerne i analytblandingen ud fra partiklens densitet. Ved denne metode koncentreres stofferne i en opløsning af cæsiums alte eller i saccharose. Metoden involverer fraktionering af partikler baseret på opdriftstæthed. Densitetsgradienten i denne metode er cæsiums altet eller saccharosemediet. Der er to typer densitetsgradientcentrifugering: rate-zonla-centrifugering og isopycnisk centrifugering.
Den hastighedszonale centrifugering involverer separationsmediet, der har en lagdelt struktur med en smal zone oven på tæthedsgradienten. I denne proces har partiklerne tendens til at bevæge sig med forskellige hastigheder under centrifugalkraften afhængigt af partiklernes tæthed. Norm alt producerer alle partiklerne pellets, fordi densiteten af partiklerne er højere end densitetsgradienten.
Isopycnisk centrifugering er den anden type densitetsgradient-centrifugeringsmetode. Det starter med en homogen opløsning. Under centrifugalkraften bevæger partiklerne i analytblandingen sig, indtil densiteten af partiklerne svarer til densitetsgradienten. Derfor kan vi også betegne denne teknik som ligevægtscentrifugering.
Hvad er forskellen mellem differential- og tæthedsgradientcentrifugering?
Differential- og densitetsgradientcentrifugering er to typer centrifugeringsprocesser involveret i adskillelsen af komponenter i en analytblanding. Den vigtigste forskel mellem differential- og tæthedsgradientcentrifugering er, at differentiel centrifugering adskiller partikler i en blanding baseret på partiklernes størrelse, hvorimod densitetsgradientcentrifugering adskiller partikler i en blanding baseret på partiklernes densitet.
Infografikken nedenfor viser flere forskelle mellem differential- og tæthedsgradientcentrifugering.
Opsummering – Differential vs Density Gradient Centrifugation
Differential- og densitetsgradientcentrifugering er to typer centrifugeringsprocesser involveret i adskillelsen af komponenter i en analytblanding. Den vigtigste forskel mellem differential- og tæthedsgradientcentrifugering er, at differentiel centrifugering adskiller partikler i en blanding baseret på partiklernes størrelse, hvorimod densitetsgradientcentrifugering adskiller partikler i en blanding baseret på partiklernes densitet.
