Nøgleforskellen mellem CLIA og ECLIA er, at CLIA bruger en kemisk metode til at generere kemiluminescens, mens ECLIA bruger en elektrokemisk metode til at generere kemiluminescenssignaler i immunoassay-teknikken.
Immunoassays bruges i vid udstrækning til identifikation og kvantificering af proteiner forbundet med sygdomme eller infektioner. Derfor er de primært afhængige af konceptet antistof-antigen-binding. Der er mange typer af immunoassays, og kemiluminescerende immunoassays er en sådan ny udviklingsteknik. Både CLIA og ECLIA bruger kemiluminescerende indikatorer.
Hvad er CLIA?
Kemiluminescerende immunoassay (CLIA) er en type immunoassay, der bruger et selvlysende molekyle til påvisning. Den luminescens, der udsendes af molekylet, detekteres på spektrofotometeret, generelt ved en bølgelængde mellem 300 – 800 nm. Kemiluminescensen forårsager excitation af atomerne, og teknikken identificerer eksergoniske kemiske reaktioner som den bedst egnede energikilde til at producere excitation.
CLIA-teknikken foregår i to hovedmetoder, nemlig direkte CLIA-teknik og indirekte CLIA-teknik. Den direkte CLIA teknik bruger direkte luminophore markører, der er bundet til målet, mens den indirekte CLIA metode bruger enzymatiske markører. De direkte luminophore markører inkluderer acidum og ruthenium estere, mens de indirekte markører inkluderer alkalisk phosphatase med adamantyl 1, 2-dioxetane ary phosphat (AMPPD) substrat og peberrodsperoxidase med luminol eller dets derivater som substrat.
Figur 01: Kemiluminescens
De vigtigste fordele ved CLIA er det brede dynamiske område af funktionalitet, høj intensitet i signallevering, fravær af baggrundsinterferens, høj specificitet, hurtighed, stabilitet og kompatibilitet med forskellige assayprotokoller. I modsætning hertil er deres høje omkostninger og begrænsninger med hensyn til antigendetektion og testpaneler ulemperne ved CLIA.
Hvad er ECLIA?
Electrochemiluminescence Immunoassay (ELCIA) er en ny teknik til udvikling af immunoassay, der bruger konceptet elektrokemiluminescens. I begrebet elektroluminescens genererer mellemprodukterne elektrokemisk. Disse elektronisk genererede mellemprodukter når derefter en exciteret tilstand og resulterer i udsendelse af lys. Bølgelængden, hvori lyset udsendes, svarer til energigabet. Kemiluminescens frembringes således på grund af, at en eller flere reaktanter produceres elektrokemisk på elektroden.
ECLIA er en nyttig analytisk applikation med høj følsomhed og specificitet. Det bruges hovedsageligt til at identificere proteiner relateret til forskellige patologiske og medicinske tilstande. Dens vigtigste fordele omfatter bredere dynamisk område, alsidighed, rumlig og tidsmæssig kontrol ved at anvende elektrodepotentialer, høj følsomhed op til picomolære områder. Men det faktum, at det kræver eksperthåndtering og de høje omkostninger, der er forbundet med det, er dets ulemper.
Hvad er lighederne mellem CLIA og ECLIA?
- Begge teknikker er afhængige af konceptet antigen-antistofbinding.
- Desuden bruges begge hovedsageligt til sygdomsdiagnostik baseret på proteinkvantificering.
- Begge er følsomme og specifikke kitmetoder.
- De bruger begrebet kemiluminescens til detektion.
- De kan automatiseres.
- Begge kræver et spektrofotometer til detektion.
- Begge har et bredt dynamisk område.
- De er dyre teknikker.
Hvad er forskellen mellem CLIA og ECLIA?
CLIA er en teknik til immunoassay, der bruger teorien om kemiluminescens, mens ECLIA er en teknik til immunoassay, der bruger teorien om elektrokemi kombineret med kemiluminescens. Så dette er den vigtigste forskel mellem CLIA og ECLIA. Derfor bruger CLIA kemiske reaktioner, der fører til udvikling af kemiluminescerende signaler, mens ECLIA bruger elektrokemiske reaktioner, der fører til udvikling af kemiluminescerende signaler.
Nedenstående infografik af forskellen mellem CLIA og ECLIA viser flere sammenligninger mellem begge teknikker.
Oversigt – CLIA vs ECLIA
CLIA og ECLIA er begge teknikker, der spiller en vigtig rolle i sygdomsdiagnostik. De er avancerede metoder til immundiagnostik baseret på konceptet antistof-antigenbinding. Den vigtigste forskel mellem CLIA og ECLIA er metoden til at generere kemiluminescens. Mens CLIA bruger kemiske reaktioner til at generere kemiluminescens efter antistof-antigenbinding, bruger ECLIA elektrokemiske reaktioner til at generere kemiluminescens. Begge teknikker er dog hurtige og specifikke.
