Nøgleforskellen mellem HPLC og UPLC er, at HPLC giver mulighed for analyse af partikler med deres størrelse omkring 5 mikrometer, mens UPLC tillader meget mindre partikler omkring 2 mikrometer.
HPLC og UPLC er begge væskekromatografiske teknikker, der er nyttige til at adskille komponenterne i en forbindelse. For at kende forskellen mellem HPLC og UPLC skal vi først vide, hvad HPLC er. Dette skyldes, at UPLC er en speciel version af HPLC, og vi kan nemt forstå det, hvis vi ved, hvad HPLC er.
Hvad er HPLC?
Udtrykket HPLC står for High Performance Liquid Chromatography. Det er en teknik, som vi kan bruge til at adskille forskellige bestanddele af en forbindelse. Det er også den mest udbredte teknik til at identificere, kvantificere og adskille komponenter i en blanding. Desuden bruger denne teknik et højt tryk til at skubbe opløsningsmidler gennem søjlen. Desuden er de vigtigste anvendelser af HPLC i biokemi til analyse af bestanddele af en forbindelse. Det er en ideel måde til adskillelse og identifikation af aminosyrer, nukleinsyrer, proteiner, kulbrinter, pesticider, kulhydrater, antibiotika, steroider og utallige andre uorganiske stoffer.
Figur 01: HPLC-system i et laboratorium
Kort fort alt er HPLC-teknikkens funktionsmåde som følger. For det første bør vi indføre prøven i strømmen af mobil fase i diskrete små mængder ved hjælp af en pumpe. Pumpetrykket skal holdes på 40 MPa. Derefter perkolerer denne strøm af mobil fase gennem HPLC-søjlen. Komponenterne i prøven passerer også gennem søjlen. Imidlertid er deres bevægelseshastigheder forskellige fra hinanden. Denne forskel opstår på grund af forskellen i interaktionerne mellem prøvekomponenterne og adsorbenten inde i søjlen. Vi kalder denne adsorbent som den stationære fase, fordi den ligger inde i søjlen (ikke bevæger sig). For det andet, i slutningen af kolonnen, kan vi opsamle prøven, der eluerer fra kolonnen. Der kan vi bestemme forskellene i retentionstider for hver komponent i prøven.
Hvad er UPLC?
Udtrykket UPLC står for Ultra High-Performance Liquid Chromatography. Det er en variation af HPLC, men driftsmetoden er den samme. Men i modsætning til HPLC tillader denne metode at analysere meget små partikler, såsom 2 mikrometer små partikler.
Figur 02: En UPLC-enhed
Desuden giver det en hurtigere analyse. I denne teknik bruger vi et 100 MPa pumpetryk til indsættelse af prøven i kolonnen. Derfor bekræfter dette høje tryk, at hele prøven indføres i kolonnen. Dette er således meget effektivt sammenlignet med HPLC.
Hvad er forskellen mellem HPLC og UPLC?
Udtrykket HPLC står for High Performance Liquid Chromatography, mens udtrykket UPLC står for Ultra High Performance Liquid Chromatography. Derfor er UPLC-teknikken en udviklet version af HPLC. Driftsmetoden er således den samme for begge teknikker. UPLC er dog mere effektiv sammenlignet med HPLC, fordi den bruger et højt pumpetryk; pumpetrykket for HPLC er 40 MPA, mens det er 100 MPa for UPLC. Derfor er dette en forskel mellem HPLC og UPLC. Frem for alt er den vigtigste forskel mellem HPLC og UPLC, at HPLC giver mulighed for analyse af partikler med deres størrelse omkring 5 mikrometer, mens UPLC tillader meget mindre partikler omkring 2 mikrometer.
Oversigt – HPLC vs UPLC
UPLC er en form for HPLC. Driftsmetoderne er således de samme. Men vi kan finde nogle forbedrede funktioner i UPLC sammenlignet med HPLC. Derfor er der en vis forskel mellem HPLC og UPLC. Den vigtigste forskel mellem HPLC og UPLC er imidlertid, at HPLC giver mulighed for analyse af partikler med deres størrelse omkring 5 mikrometer, mens UPLC tillader meget mindre partikler omkring 2 mikrometer.
