Nøgleforskellen mellem hældeplade og spredeplade er, at et kendt volumen af prøven spredes på overfladen af agarmediet i spredepladen, mens et kendt volumen af prøven i hældeplade blandes med agar og hældes derefter på en tallerken. Når man sammenligner nøjagtigheden af disse to teknikker, har hældepladen en højere nøjagtighed end spredningspladen.
Standard pladetællingsmetode er en vækstbaseret tilgang, der tæller antallet af levende (voksende/dyrkbare/levedygtige) mikroorganismer i en prøve. Det er en kraftfuld metode i brug på mange mikrobiologiske områder til at analysere antallet af levende mikroorganismer. Områder som fødevarer og mejeri, medicin, miljø, akvatisk og landbrug, mikrobiel genetik, molekylær mikrobiologi, vækstmedieudvikling og bioteknologi (bioreaktorteknologi, fermentering, spildevands-/spildevandsbehandling osv.) anvender denne teknik. Derudover er der to hovedmåder at udføre en standard tallerkentælling: de er, Spread plate teknik og hælde tallerken teknik.
Hvad er Pour Plate?
Hældepladeteknik er en mikrobiel metode til at optælle nogle levedygtige celler, der er til stede i en prøve. Det særlige ved hældeplademetoden er, at et kendt volumen af prøven først blandes med agar og derefter hældes i pladen.
Figur 01: Hæld tallerken
Andre trin ligner spredepladeteknikken, der diskuteres i næste afsnit. Det næste trin efter at have hældt agaren blandet med prøven er at lade den størkne og inkubere. Efter inkubation er det afgørende at tælle antallet af levedygtige kolonier for at beregne den endelige CFU for 1 g eller 1 ml.
Hvad er Spread Plate?
Spredeplade er en teknik til at optælle levedygtige celler i en prøve. Til denne teknik er en seriefortynding nødvendig for prøven for at sikre, at mindst én giver anledning til et tælleligt antal kolonier. Processen her er at pipettere et bestemt volumen af fortynding på overfladen af en agarplade og sprede det hurtigt og jævnt over agaroverfladen med en glasspreder, som er blevet alkoholopvarmet og afkølet. Det er nødvendigt at udføre replikaterne for at opnå en pålidelig middelværdi. Næste trin er at tørre disse plader i en kort periode, og derefter vende og placere dem i en inkubator ved en passende temperatur til vækst og i en fastsat inkubationsperiode.
Figur 02: Spredeplade
Efter inkubation vil en undersøgelse af pladerne vise væksten. Ved en eller flere fortyndinger vil antallet af celler, der er til stede i podemidlerne (f.eks. 100 eller 200μl) give anledning til mellem 30 og 300 diskrete kolonier på agaroverfladen. Mindre end 30 kolonitællinger er statistisk upålidelige. Tal over 300 er svære at optælle og tilbøjelige til at fejle.
Hvad er lighederne mellem hældeplade og smøreplade?
- Spredeplade og hældeplade er to teknikker til at opnå antallet af levedygtige celler til stede i en prøve.
- Begge er ligetil metoder.
- Sampling fejl kan forekomme i begge metoder.
- Begrænsninger af vækstbetingelser påvirker resultatet af begge metoder.
- Tekniske fejl kan også forstyrre det endelige resultat af begge metoder.
- Selv om de er levedygtige, er de to metoder ikke i brug til at dyrke ikke-dyrkbare bakterier.
Hvad er forskellen mellem hældeplade og smøreplade?
Hældeplade er en mikrobiel teknik til at optælle et antal levedygtige celler i en prøve. Spredepladeteknik er en anden teknik til at opregne bakterierne, der dyrkes på overfladen af mediet. I hældepladeteknik er processen at tilføje prøven på den størknede mediumoverflade på hældepladen. Men i spred-pladeteknikken er processen at blande prøven med den smeltede agar og derefter hælde den i pladen.
Med hensyn til nøjagtigheden af disse to teknikker har hældepladen en højere nøjagtighed end spredepladen. Desuden, i modsætning til en hældeplade, bruges en glasspreder til at sprede prøven jævnt på overfladen på en spredeplade. Ved at bruge hældeplade er det endvidere muligt at opregne de aerobe, anaerobe og fakultative anaerobe. Men ved at bruge spredepladen er det kun muligt at optælle aeroberne. Ydermere er størknede agarplader nødvendige for at udføre spredeplader, mens flydende smeltede agarmedier er nødvendige for hældemetoden.
Opsummering – Hældplade vs Spread Plate
Hældeplade og Spread-plade er to teknikker inden for mikrobiologi til at lette optællingen af mikrobielle celler i en prøve. Begge metoder er vækstbaserede, og mål derfor de levedygtige celler. Under hældepladen blandes et kendt volumen af prøven med den smeltede agar og hældes i pladen. Under spredningspladen spredes et kendt volumen på overfladen af det størknede agarmedium. Dette er forskellen mellem hældeplade og smøreplade.
