Nøgleforskellen mellem insertions- og erstatningsvektorer er, at insertionsvektoren har evnen til at indsætte moderate længder af fremmed DNA, mens erstatningsvektoren har evnen til at rumme større længder af fremmed DNA.
Fagvektorer er de bakteriofager, der bruges til kloning. Der er to typer fagvektorer; de er insertionsvektor og erstatningsvektor. Desuden består alle fagvektorer af ikke-essentielle gener. Disse gener skal dog fjernes fra fager for at lette nye fremmede DNA-inserts.
Hvad er en indsættelsesvektor?
Først og fremmest er insertionsvektor den enkleste form for lambda-kloningsvektorer. Faktisk er det en type fagvektor, der har et unikt restriktionssted indført i vektorgenomet ved positionen af valgfrit DNA. Endvidere forbliver fag-DNA'et uden en fjernelse. Denne ikke-fjernelse af fag-DNA'et indskrænker størrelsen af de indsættelser (fremmed DNA), der skal klones i vektoren. Desuden er disse vektorer nyttige til cDNA-kloning og ekspression. GT10, GT11 og Zap er eksempler på denne vektor.
Figur 01: Lambda Phage
Indsættelsesvektor består af et enkelt genkendelsessted. Den primære funktion af denne vektor er at udvikle cDNA-biblioteker afledt af eukaryote mRNA-sekvenser. Desuden kan den kun rumme længder af fremmed DNA, der spænder mellem 05-11 kb. Det har også et unikt sp altningssted til indsættelse af fremmed DNA.
Hvad er erstatningsvektorer?
Erstatningsvektor eller substitutionsvektor er en type fagvektor udviklet fra fjernelse af et midterste "fyldstoffragment"-område af fag-DNA. Det ønskede fremmede DNA-insert erstatter fag-DNA'et.
Figur 02: Udskiftningsvektor
Erstatningsvektorer er vigtige for at skabe genomiske biblioteker såsom EMBL4 og Charon40. Disse vektorer kan rumme en større længde af fremmed DNA, der spænder mellem 08-24 kb længder. Fyldningsområdet består også af et gen, der gør fagvektoren ikke-levedygtig inde i en bakteriel vært.
Hvad er lighederne mellem indsættelses- og erstatningsvektorer?
- Insertions- og erstatningsvektorer er fagvektorer.
- Begge vektorer rummer fremmede DNA-indsættelser.
- De er begge nyttige til at skabe DNA-biblioteker.
Hvad er forskellen mellem indsættelses- og erstatningsvektorer?
Insertion vs Replacement Vectors |
|
| Insertionsvektor er en type fagvektor, der har et restriktionssted indført i faggenomet på stedet for valgfrit DNA. | Erstatningsvektor er en type fagvektor udviklet fra fjernelse af et midterste "fyldstoffragment"-område af fag-DNA |
| Størrelse af indstiksfragmenter | |
| 05-11 kb længde | 08-24 kb længde |
| Filler Fragment | |
| Intet fyldstoffragment | Fyldfragment bliver erstattet af en fremmed indsættelse |
| Funktion | |
| Vigtigt at oprette cDNA-biblioteker | Vigtigt ved oprettelse af genombiblioteker |
| Eksempler | |
| GT10, GT11 og Zap er eksempler | EMBL4 og Charon40 er eksempler |
| Cleavage Site | |
| Der findes et unikt sp altningssted | Sp altningssted indeholder gener, der ikke er essentielle for den lytiske cyklus |
Summary – Insertion vs Replacement Vectors
Både insertions- og erstatningsvektorer er to typer fagvektorer. Begge vektorer har restriktionssteder, som letter akkommodationen af nye fremmede DNA-inserts. Insertionsvektorer er vigtige til at skabe cDNA-biblioteker, mens erstatningsvektorer er vigtige til at skabe genomiske biblioteker. Endvidere rummer insertionsvektorer DNA-inserts med en moderat længde. Men erstatningsvektorer kan rumme højere længder af fremmede DNA-inserts. Alt i alt er dette den vigtigste forskel mellem indsættelses- og erstatningsvektorer.
