Nøgleforskellen mellem spektrofotometer og spektrofluorometer er, at spektrofotometer involverer måling af absorption, hvorimod spektrofluorometer involverer overgangen af polyatomiske fluorescerende molekyler fra deres højere energiniveau til en grundtilstand ved at sænke deres energiniveau gennem emission af fotoner.
Et spektrofotometer er et analytisk instrument, der kan måle koncentrationen af en prøve ved at måle lysabsorption. Spektrofluorometer er et analytisk instrument, hvor fluorescerende egenskaber af nogle forbindelser bruges for at få information om koncentrationen og de kemiske egenskaber af prøven.
Hvad er et spektrofotometer?
Et spektrofotometer er et analytisk instrument, der kan måle koncentrationen af en prøve ved at måle lysabsorption. Den bruger et materiales reflektions- eller transmissionsegenskaber som en funktion af bølgelængden. Dette instrument kan også fungere ved synligt lys, nær UV-lys og nær IR-lys. Vi bruger en kuvette til at placere prøven inde i instrumentet. Derefter passerer en lysstråle gennem prøven og diffrakterer til et spektrum af bølgelængder. Derefter måler instrumentet intensiteterne via en ladekoblet enhed. Til sidst får vi resultaterne af analysen på displayenheden efter at have passeret detektoren.
Figur 01: Spektrofotometer
Vi kan også bruge dette instrument til at detektere organiske forbindelser. Det er ved at bestemme absorptionsmaksima. Desuden kan vi bruge det til at bestemme farven inden for et spektralområde. Vigtigst er det, at vi bruger det til at måle koncentrationen af en komponent i en prøve ved at bestemme mængden af lys, der absorberes af den komponent.
Hvad er Spectrofluorometer?
Spektrofluorometer er et analytisk instrument, hvor fluorescerende egenskaber af nogle forbindelser bruges for at få information om koncentrationen og de kemiske egenskaber af prøven. I dette instrument skal vi vælge en vis excitationsbølgelængde. Vi kan observere emissionen ved en enkelt bølgelængde, eller vi kan bare scanne prøven for at registrere intensiteten i forhold til bølgelængden. Dette kaldes også et emissionsspektrum. Vi kan bruge dette instrument til fluorescensspektroskopi.
Dette instrument bruger typisk en lyskilde med høj intensitet til bombardement af en prøve med et stort antal fotoner. Derfor tillader det et maksim alt antal molekyler at opnå en exciteret tilstand på et bestemt tidspunkt på et givet tidspunkt. I denne proces kan lyset passere gennem et filter ved en valgt fast bølgelængde. Eller også kan lys passere gennem en monokromator, der kan tillade, at en bølgelængde kan vælges, hvilket gør det muligt at bruge det spændende lys. I dette instrument opsamles emissionen i en retning, der er vinkelret på det udsendte lys. Desuden kan emissionen føres gennem et filter eller en monokromator, før den detekteres af et fotomultiplikatorrør, fotodiode eller ladningskoblet enhedsdetektor. Endvidere gives signalet enten som en digital udgang eller som en analog udgang.
Figur 02: Spektrofluorometer
Der er mange andre muligheder tilgængelige i dette instrument: polarisatorer, kryostater, cold finger dewars, LED'er for levetider, filterholdere, manuelle slidser, filterhjul, computerstyrede slidser, integrerende sfærer osv.
Hvad er forskellen mellem spektrofotometer og spektrofluorometer?
Spektrofotometer og spektrofluorometer er vigtige analytiske instrumenter. Den vigtigste forskel mellem spektrofotometer og spektrofluorometer er, at spektrofotometer involverer måling af absorption, hvorimod spektrofluorometer involverer overgangen af polyatomære fluorescerende molekyler fra deres højere energiniveau til en grundtilstand ved at sænke deres energiniveau gennem emission af fotoner.
Nedenstående infografik præsenterer forskellene mellem spektrofotometer og spektrofluorometer i tabelform til sammenligning side om side.
Opsummering – Spektrofotometer vs Spectrofluorometer
Spektrofotometer og spektrofluorometer er vigtige analytiske instrumenter. Den vigtigste forskel mellem spektrofotometer og spektrofluorometer er, at spektrofotometer involverer måling af absorption, hvorimod spektrofluorometer involverer overgangen af polyatomiske fluorescerende molekyler fra deres højere energiniveau til en grundtilstand ved at sænke deres energiniveau gennem emission af fotoner.
