Nøgleforskellen mellem absorbans og fluorescens er, at vi kan bruge en absorbansanalyseteknik til direkte at måle mængden af en specifik bølgelængde, der absorberes af en prøve uden fortynding eller analyseforberedelse, hvorimod fluorescensanalyse kræver prøveforberedelse, hvori prøve af interesse skal bindes med de fluorescerende reagenser i et assaykit.
Absorbans og fluorescens er vigtige analytiske teknikker, som vi kan bruge til at detektere forskellige egenskaber i en given prøve.
Hvad er absorption?
Absorbans er et mål for et stofs evne til at absorbere lys af en specificeret bølgelængde. Specifikt er det lig med logaritmen af transmittansens reciproke. I modsætning til optisk tæthed måler absorbans mængden af lys, der absorberes af et stof.
Yderligere måler spektroskopi absorbans (ved hjælp af kolorimeter eller spektrofotometer). Absorbansen er en dimensionsløs egenskab i modsætning til de fleste andre fysiske egenskaber. Der er to måder at forklare absorbans på: som lyset absorberet af en prøve eller som lyset transmitteret gennem en prøve. Ligningen for beregning af absorbans er som følger:
A=log10(I0/I)
Hvor A er absorbans, er I0 den stråling, der transmitteres fra prøven, og I er den indfaldende stråling. Den følgende ligning ligner også ovenstående ligning med hensyn til transmittans (T).
A=-log10T
Hvad er fluorescens?
Fluorescens er emission af lys fra et stof, der tidligere har absorberet energi. Sådanne stoffer skal absorbere lys eller enhver anden elektromagnetisk stråling for at udsende lys som fluorescens. Desuden er dette udsendte lys en type luminescens, hvilket betyder, at det udsender spontant. Det udsendte lys har ofte en længere bølgelængde end det absorberede lys. Det betyder, at den udsendte lysenergi er lavere end den absorberede energi.
Under fluorescensprocessen udsendes lys som følge af excitation af atomer i stoffet. Den absorberede energi frigives ofte som luminescens i løbet af en meget kort tidsperiode, omkring 10-8 sekunder. Det betyder, at vi kan observere fluorescens, så snart vi fjerner strålingskilden, der forårsager excitation.
Der er mange anvendelser af fluorescens inden for forskellige områder, såsom mineralogi, gemologi, medicin, kemiske sensorer, biokemisk forskning, farvestoffer, biologiske detektorer, produktion af fluorescerende lamper osv. Desuden kan vi finde denne proces som en naturlig proces også; f.eks. i nogle mineraler.
Hvad er forskellen mellem absorption og fluorescens?
Absorbans og fluorescens er vigtige analytiske teknikker, som vi kan bruge til at påvise forskellige egenskaber i en given prøve. Den vigtigste forskel mellem absorbans og fluorescens er, at vi kan bruge en absorbansanalyseteknik til direkte at måle mængden af en specifik bølgelængde, der absorberes af en prøve uden fortynding eller analyseforberedelse, hvorimod fluorescensanalyse kræver prøveforberedelse, hvor prøven af interesse skal være bundet med de fluorescerende reagenser i et assaykit. Desuden er fluorescensteknikken mere effektiv end absorbans, fordi analysen i fluorescens er meget specifik for målanalytten.
Nedenstående infografik præsenterer forskellene mellem absorbans og fluorescens i tabelform til sammenligning side om side
Opsummering – Absorbans vs fluorescens
Absorbans er et mål for et stofs evne til at absorbere lys af en specificeret bølgelængde. Fluorescens er emission af lys fra et stof, der tidligere har absorberet energi. Den vigtigste forskel mellem absorbans og fluorescens er, at vi kan bruge en absorbansanalyseteknik til direkte at måle mængden af en specifik bølgelængde, der absorberes af en prøve uden fortynding eller analyseforberedelse, hvorimod fluorescensanalyse kræver prøveforberedelse, hvor prøven af interesse skal være bundet med de fluorescerende reagenser i et assaykit.
