Nøgleforskellen mellem progressiv og regressiv farvning er, at ved progressiv farvning efterlades vævet i farvningsopløsningen lige længe nok til at nå det ønskede endepunkt, mens vævet ved regressiv farvning efterlades bevidst til overfarvning, indtil farvestoffet mætter alle vævselementer og affarves derefter.
Farvning er en teknik, der fremhæver og differentierer vævskomponenter og gør det muligt at observere under mikroskop. H- og E-farvning er den generelle vævsfarvningsprocedure, der er mest almindeligt anvendt i histologi. Den bruger hæmatoxylin og eosin (modfarvning). Nuklear farvning ved hjælp af hæmatoxylin kan opnås med progressive eller regressive farvningsteknikker. Nogle hæmatoxylin-formuleringer anvendes til progressiv farvning. Mayers hæmatoxylin er et eksempel. Progressive pletter har en lav hæmatoxylinkoncentration. Derfor farver de langsomt og selektivt kromatinen. Nogle andre formuleringer bruges til regressiv farvning. Harris hæmatoxylin bruges til regressiv farvning. Regressive pletter har en høj koncentration af hæmatoxylin; derfor diffunderer pletten hurtigt over hele cellen.
Hvad er progressiv farvning?
Progressiv farvning er en teknik, der tillader vævet i farvningsopløsningen lige længe nok til at nå det ønskede endepunkt. Derfor er hyppig overvågning af pletkvaliteten nødvendig for at bestemme færdiggørelsen af farvningen. Farvningsintensiteten styres af nedsænkningstiden.
Figur 01: Hæmatoxylinstruktur
Gills hæmatoxylin og Mayers hæmatoxylin er progressive i naturen. For disse to hæmatoxylinger bruges en farvningstid på 5-10 minutter almindeligvis ved progressiv farvning. Generelt er progressive hæmatoxyliner mindre koncentrerede. Derfor farver de langsomt og selektivt kromatin. Ved progressiv farvning farver hæmatoxylin primært kromatinen til den ønskede intensitet. Det kræver således ikke differentiering i fortyndet sur alkohol for at trække den overskydende plet ud.
Hvad er regressiv farvning?
Regressiv farvning er en hurtigere farvningsteknik, hvor vævet bevidst overfarves, indtil farvestoffet mætter alle vævskomponenter. Derefter affarves vævet selektivt, indtil det når det korrekte endepunkt. Affarvningstrin kaldes differentiering. Differentiering udføres for at fjerne overskydende pletter. Norm alt gøres det ved at bruge fortyndet sur alkohol.
Figur 02: H- og E-farvning
Harris hæmatoxylin er den populært anvendte type hæmatoxylin. Ehrlichs og Delafields hæmatoxyliner bruges også til regressiv farvning. Regressive pletter har en høj koncentration af hæmatoxylin. Derfor diffunderer de hurtigt hele cellen og overfarver kromatinet og cytoplasmaet. Regressiv farvning foretrækkes, når meget tydelig differentiering af vævselementer er påkrævet.
Hvad er lighederne mellem progressiv og regressiv farvning?
- Progressiv og regressiv farvning er to typer farvningsteknikker.
- Begge bruger farvestoffet hæmatoxylin.
Hvad er forskellen mellem progressiv og regressiv farvning?
Progressiv farvning er en langsommere farvningsproces, hvor vævet efterlades i farvningsopløsningen lige længe nok til at nå det ønskede slutpunkt. I modsætning hertil er regressiv farvning en hurtigere farvningsproces, hvor vævet bevidst overfarves og derefter affarves. Så dette er den vigtigste forskel mellem progressiv og regressiv farvning.
En anden væsentlig forskel mellem progressiv og regressiv farvning er desuden, at progressiv farvning ikke kræver et ekstra trin kaldet differentiering, mens regressiv farvning kræver differentiering for at fjerne overskydende pletter. Desuden har progressive pletter en lav koncentration af hæmatoxyliner, mens regressive pletter har en højere koncentration af hæmatoxyliner.
Nedenstående infografik viser flere forskelle mellem progressiv og regressiv farvning.
Opsummering – Progressiv vs Regressiv farvning
Progressiv farvning er en langsom farvningsteknik, hvor vævet efterlades i farvningsopløsningen lige længe nok til at nå endepunktet. Derfor er overfarvning ikke gjort, er progressiv farvning. I modsætning hertil er regressiv farvning en hurtigere farvningsteknik, hvor vævet er overfarvet og derefter affarvet. Progressiv farvning kræver ikke differentiering (fjernelse af overskydende pletter), mens regressiv farvning kræver differentiering i fortyndet sur alkohol for at fjerne overskydende pletter. Progressive pletter har generelt en lav koncentration af hæmatoxyliner, mens regressive pletter har mere koncentration af hæmatoxyliner. Dette opsummerer således forskellen mellem progressiv og regressiv farvning.