Nøgleforskel – DMEM vs EMEM
Dyrecelledyrkning udføres for at vedligeholde dyrecellelinjer for at udføre mange forskningsaktiviteter. Dyrecellelinjer holdes under sterile forhold, og de kræver specielle teknikker. De bruges i undersøgelser vedrørende vaccineproduktion, til at identificere cellens adfærd over for kræftfremkaldende stoffer og mutagener og i kræftforskning. Cellekulturmedierne er meget vigtige for succesen med dyrecellekultur. Der er forskellige typer cellekulturmedier såsom Dulbeccos Modified Eagle Medium (DMEM) og Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM). DMEM er et modificeret bas alt medium med øgede aminosyre- og vitaminkoncentrationer op til en firedobling. Dette omfatter også nogle flere substitutioner, der øger mediets næringsstofforhold. EMEM er en af de første typer dyrecellekulturmedier udviklet af Harry Eagle. Det er et simpelt, bas alt medie med minimale mængder af næringsstofsammensætninger. Den vigtigste forskel mellem to medier er næringsstofsammensætningen. EMEM er sammensat af de minimale koncentrationer af næringsstoffer, der kræves for væksten af kulturen, hvorimod DMEM er et meget komplekst medie med øgede koncentrationer af aminosyrer og vitaminer.
Hvad er DMEM?
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) er en modificeret medietype, der er kommercielt fremstillet som et cremet hvidt pulver. Dette er tilpasset fra EMEM, og næringsstofsammensætningen modificeres ved at øge koncentrationen af aminosyrer og vitaminer. Koncentrationen af aminosyrer øges op til to gange i forhold til basalmediet. Vitaminkoncentrationen øges op til det firdoblede og øger derved næringsindholdet i mediet.
DMEM modificeres også ved at tilføje flere s alte såsom jernnitrat, natriumpyruvat og nogle ikke-essentielle aminosyrer såsom serin og glycin. Koncentrationen af glucose i mediet ændres også. Den originale formulering er sammensat af 1000 mg/L glucose, hvorimod koncentrationen i DMEM øges op til 4500 mg/L. DMEM kræver også tilskud af et serummedium, da det ikke er et komplet medium. Oftest suppleres DMEM med Fetal Bovine Serum (FBS). FBS giver de nødvendige proteiner og vækstfaktorer til dyrkningsprocessen.
Mediets pH varierer ved tilsætning af natriumbicarbonat. pH i mediet før tilsætning af natriumbicarbonat er omkring 6,80 - 7,40, hvorimod pH efter tilsætning af natriumbicarbonat ligger i området 7,60 - 8,20. Mediets opbevaringstemperatur er 2 – 8 0C.
Figur 01: DMEM
Ansøgninger af DMEM
- At studere den plakdannende evne af polyomavirus i embryonale museceller.
- I undersøgelser af kontakthæmning
- I kyllingecellekulturer
Hvad er EMEM?
Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM) er et af de første udviklede medier i celledyrkning af dyrecellelinjer. De første typer dyrecellelinjer dyrket ved hjælp af EMEM inkluderer muse L-celler og HeLa-celler. EMEM-mediet er også en type modificeret medie. Harry Eagle formulerede først EMEM-mediet. EMEM-medier inkluderede de essentielle aminosyrer og vitaminer i en minimumskoncentration, der kræves af celletyperne. De ikke-essentielle aminosyrer var ikke inkluderet i formuleringen, og koncentrationerne af glucose og natriumbicarbonat er reduceret. Selvom mediet indeholdt den afbalancerede mængde af minimale vækstkrav til en vellykket vækst af cellerne.
EMEM er ikke et komplet medie. Derfor er tilskud med serum påkrævet for en vellykket vækst af pattedyrcellerne. EMEM bruges på en bred vifte af celler og er stadig et populært medie blandt cellekulturforskere.
Hvad er lighederne mellem DMEM og EMEM?
- Begge medietyper bruges i dyrecellekultur.
- Begge medietyper er flydende formuleringer.
- Begge medietyper er modificerede medier fra basalmediet.
- Begge medietyper indeholder de essentielle aminosyrer, vitaminer og uorganiske s alte, som er nødvendige for vækst.
- Begge medietyper er ufuldstændige. Derfor bør serum tilsættes.
- Begge medietyper bruger glukose som sin kulstofkilde.
- Begge medietyper har en højere pH og justeres ved at tilsætte natriumbicarbonat.
Hvad er forskellen mellem DMEM og EMEM?
DMEM vs EMEM |
|
| DMEM er en modificeret type basalmedium med øgede aminosyre- og vitaminkoncentrationer. Dette inkluderer også nogle flere substitutioner, som øger mediets næringsstofforhold. | EMEM er en af de første typer dyrecellekulturmedier udviklet af Harry Eagle. Det er et simpelt, bas alt medie med minimale mængder af næringsstofsammensætninger. |
| Ændringer af aminosyre | |
| Aminosyrekoncentrationen er steget op til det dobbelte i DMEM-medium. | Minimal koncentration af aminosyre bruges i EMEM. |
| Ændringer af vitaminer | |
| Vitaminkoncentrationen er steget op til fire gange i DMEM. | Minimal koncentration af vitaminer bruges i EMEM. |
| Glukosekoncentration | |
| Glucosekoncentrationen er steget op til 4500 mg/L i DMEM. | Glucosekoncentrationen er 1000 mg/L i EMEM. |
| Tilstedeværelse af ikke-essentielle aminosyrer | |
| Presenteret i DMEM. | Fraværende i EMEM. |
| Tilstedeværelse af yderligere komponenter | |
| Komponenter som jernnitrat, natriumpyruvat er til stede i DMEM. | EMEM indeholder den minimale mængde næringsstoffer. |
Oversigt – DMEM vs EMEM
DMEM og EMEM er to populære dyrecellekulturmedier, der hovedsageligt adskiller sig i deres næringsstofsammensætninger. DMEM er modificeret form af EMEM, hvor næringsstofkoncentrationerne øges sammen med tilføjelse af nogle nye komponenter. EMEM er et minim alt medie og indeholder alle de væsentlige faktorer, der kræves for en vellykket vækst af dyrecellelinjer. Disse medier bør anvendes under højsterile forhold, og begge medier bør suppleres med serum før brug. Dette er forskellen mellem DMEM og EMEM.
Download PDF'en af DMEM vs EMEM
Du kan downloade PDF-versionen af denne artikel og bruge den til offline-formål i henhold til citatnotat. Download venligst PDF-version her Forskel mellem DMEM og EMEM
