Nøgleforskellen mellem UV vis og fluorescensspektroskopi er, at UV-synlig spektroskopi måler absorptionen af lys i det UV-synlige område, hvorimod fluorescensspektroskopi måler det lys, der udsendes af en prøve i fluorescensområdet efter at have absorberet lys kl. høj energi end det udsendte energiniveau.
Spektroskopi er en teknik til måling af absorption og emission af lys og anden stråling fra stof.
Hvad er UV Vis-spektroskopi?
UV synlig spektroskopi er en analytisk teknik, der bruger absorptionen eller reflektansen af en del af UV-området og komplette tilstødende synlige områder af det elektromagnetiske spektrum. Denne teknik findes i to typer; de er absorptionsspektroskopi og reflektansspektroskopi. Den bruger lys i de synlige og tilstødende områder.
Generelt kan absorptionen eller reflektansen af det synlige lysområde direkte påvirke den opfattede farve af de kemikalier, der er involveret i processen. På dette område af spektret kan vi observere, at atomer og molekyler kan gennemgå elektroniske overgange. Her er absorptionsspektroskopi komplementær til fluorescensspektroskopi, hvor fluorescens beskæftiger sig med elektronernes overgange fra den exciterede tilstand til grundtilstanden. Derudover måler absorption overgangene fra grundtilstanden til den exciterede tilstand.
Figur 01: UV synlig spektroskopi
Denne spektroskopiske teknik er nyttig til at analysere forskellige prøver kvantitativt, såsom overgangsmetallioner, stærkt konjugerede organiske forbindelser og makromolekyler i biologiske systemer. Generelt udføres spektroskopisk analyse ved hjælp af opløsninger, men vi kan også bruge faste stoffer og gasser.
Hvad er fluorescensspektroskopi?
Fluorescensspektroskopi er en type elektromagnetisk spektroskopi, der er nyttig til at analysere fluorescens fra en prøve. Denne teknik involverer brugen af en lysstråle (såsom UV) til at excitere elektroner i molekyler af nogle forbindelser, og det kan få dem til at udsende lys. Denne emission er typisk synligt lys, men ikke nødvendigvis den samme.
Figur 02: Fluorescensspektroskopi
Molekyler har typisk forskellige tilstande, der er kendt som energiniveauer. Denne teknik beskæftiger sig primært med elektroniske og vibrationstilstande. Ofte har analytprøven molekyler i en jordet elektronisk tilstand og en exciteret tilstand med højere energi. Disse to elektroniske tilstande har forskellige vibrationstilstande imellem sig. Under fluorescensprocessen exciteres de kemiske arter ved at absorbere fotoner og bevæger sig fra en grundtilstand til et højere energiniveau. Herefter får kollisionerne mellem andre molekyler de exciterede molekyler til at miste vibrationsenergi, indtil det kommer til en lav vibrationstilstand fra denne exciterede tilstand. Dette udsender fotoner med forskellige energier og forskellige frekvenser. Dette kaldes fluorescens. Vi kan analysere disse forskellige frekvenser udsendt på denne måde for at bestemme de forskellige vibrationsniveauer.
Hvad er forskellen mellem UV Vis og fluorescensspektroskopi?
Spektroskopiske teknikker er nyttige til at studere egenskaberne af forskellige kemiske stoffer. Nøgleforskellen mellem UV vis og fluorescensspektroskopi er, at UV-synlig spektroskopi måler absorptionen af lys i det UV-synlige område, hvorimod fluorescensspektroskopi måler det lys, der udsendes af en prøve i fluorescensområdet efter at have absorberet lys med høj energi end det udsendte energiniveau. Desuden er fluorescensspektroskopi mere følsom end UV-synlig spektroskopi.
Nedenstående infografik præsenterer forskellene mellem UV-vis og fluorescensspektroskopi i tabelform til side-by-side sammenligning.
Opsummering – UV Vis vs fluorescensspektroskopi
Spektroskopi er en vigtig analytisk teknik. Der er forskellige typer spektroskopier, såsom IR-spektroskopi, UV synlig spektroskopi, fluorescensspektroskopi osv. Den vigtigste forskel mellem UV vis og fluorescensspektroskopi er, at UV-synlig spektroskopi måler absorptionen af lys i det UV-synlige område, hvorimod fluorescens spektroskopi måler det lys, der udsendes af en prøve i fluorescensområdet efter at have absorberet lys med høj energi end det udsendte energiniveau.
