Nøgleforskellen mellem fluorescensmikroskopi og konfokalmikroskopi er, at i fluorescensmikroskopi oversvømmes hele prøven jævnt i lys fra en lyskilde, hvorimod i konfokalmikroskopi kun nogle punkter af prøven udsættes for lys fra en lyskilde.
Fluorescensmikroskopi er en vigtig analytisk teknik, der er nyttig til at studere egenskaberne af organiske eller uorganiske stoffer. Konfokal mikroskopi er en analytisk teknik, der er nyttig til at øge den optiske opløsning og kontrast af et mikrofotografi ved hjælp af et rumligt nålehul til at blokere ufokuseret lys i billeddannelsen.
Hvad er fluorescensmikroskopi?
Fluorescensmikroskopi er en vigtig analytisk teknik, der er nyttig til at studere egenskaberne af organiske eller uorganiske stoffer. Det instrument, vi bruger til denne måling, er et fluorescensmikroskop. Det er en type optisk mikroskop. Denne type optiske mikroskop bruger fluorescens i stedet for spredning, refleksion, dæmpning og absorption eller som supplement til dem.
Et fluorescensmikroskop bruger fluorescens til at generere et billede. Det kan være en simpel opsætning som et epifluorescensmikroskop eller et mere kompliceret design, inklusive et konfok alt mikroskop, der bruger optisk sektionering. Dette hjælper med at få en bedre opløsning af fluorescensbilledet.
Figur 01: Et fluorescensmikroskop
Når vi overvejer princippet om fluorescensmikroskopi, bør vi bruge prøven til belysning med lys af en bestemt bølgelængde. Der absorberer prøven lys af fluoroforer, som får dem til at udsende lys med længere bølgelængder. Det er vigtigt at adskille det oplyste lys fra meget svagere udsendt fluorescens ved at bruge et spektralemissionsfilter.
Typisk indeholder et fluorescensmikroskop en lyskilde, excitationsfilter, dikroisk spejl og et emissionsfilter. Lyskilden kan være en xenonbuelampe, kviksølvdamplampe, LED'er og lasere. Det dikroiske spejl er også kendt som en dikroisk strålesplitter.
Hvad er konfokal mikroskopi?
Konfokal mikroskopi er en analytisk teknik, der er nyttig til at øge den optiske opløsning og kontrast af et mikrofotografi ved hjælp af et rumligt nålehul til at blokere ufokuseret lys i billeddannelsen. Det er også kendt som konfokal laser scanningsmikroskopi eller laser konfokal scanningsmikroskopi. Det er en optisk billedbehandlingsteknik.
I denne mikroskopiske teknik muliggør optagelse af flere 2D-billeder i forskellige dybder i en prøve rekonstruktion af 3D-strukturer i et objekt. Den konfokale mikroskopiske teknik er meget anvendelig i videnskabelige og industrielle samfund. Det bruges typisk i biovidenskab, halvlederinspektion og materialevidenskab.
Figur 02: Konfokalpunktsensorprincippet fra Minskys patent
Under processen rejser lyset gennem prøven under et konventionelt mikroskop så langt ind i prøven, som det kan trænge ind, mens et konfok alt mikroskop, der kun fokuserer en mindre lysstråle, passerer gennem et sm alt dybdeniveau ad gangen. Denne teknik blev udviklet af Marvin Minsky i 1957.
Hvad er forskellen mellem fluorescensmikroskopi og konfokalmikroskopi?
Fluorescensmikroskopi er en vigtig analytisk teknik, der er nyttig til at studere egenskaberne af organiske eller uorganiske stoffer. Konfokal mikroskopi er en analytisk teknik, der er nyttig til at øge den optiske opløsning og kontrast af et mikrofotografi ved hjælp af et rumligt nålehul til at blokere ufokuseret lys i billeddannelsen. Den vigtigste forskel mellem fluorescensmikroskopi og konfokalmikroskopi er, at i fluorescensmikroskopi oversvømmes hele prøven jævnt i lys fra en lyskilde, hvorimod i konfokalmikroskopi kun nogle punkter af prøven udsættes for lys fra en lyskilde.
Nedenstående infografik præsenterer forskellene mellem fluorescensmikroskopi og konfokalmikroskopi i tabelform til sammenligning side om side.
Opsummering – Fluorescensmikroskopi vs konfokalmikroskopi
Fluorescensmikroskopi og konfokalmikroskopi er to analytiske teknikker involveret i optisk billeddannelse. Den vigtigste forskel mellem fluorescensmikroskopi og konfokalmikroskopi er, at i fluorescensmikroskopi oversvømmes hele prøven jævnt i lys fra en lyskilde, hvorimod i konfokalmikroskopi kun nogle punkter af prøven udsættes for lys fra en lyskilde.