Nøgleforskel – immuncytokemi vs immunhistokemi
Immunocytokemi (ICC) og Immunohistokemi (IHC) er to meget anvendte teknikker i molekylær diagnostik, som identificerer og bekræfter forekomsten af både ikke-smitsomme sygdomme og overførbare sygdomme baseret på de molekylære markører, der findes på celler. Nøgleforskellen immuncytokemi og immunhistokemi er det molekyle, der bruges som analyseprocedure i disse teknikker. I ICC anvendes primære og sekundære antistoffer konjugeret med markører såsom fluorescens, hvorimod IHC, monoklonale og polyklonale antistoffer bruges til de diagnostiske bestemmelser.
Hvad er immuncytokemi (ICC)?
ICC bruger primære og sekundære antistoffer bundet til markører såsom fluorescerende markører eller enzymer og er en kraftfuld detektionsmetode til at detektere antigener til stede på målceller, som enten kan være infektiøse cellulære partikler eller cancerøse tumorceller. Der kræves tre typer kontroller til immuncytokemi.
- Primært antistof – kontrol, der viser specificiteten af det primære antistof, der binder til antigenet
- Sekundært antistof – kontrol, der viser, at mærket er specifikt for det primære antistof
- Etiketkontroller – vis, at mærkningen er resultatet af den tilføjede etiket og ikke resultatet af endogen mærkning.
Figur 01: Immuncytokemi mærker individuelle proteiner i celler (her er Tyrosinhydroxylase i axonerne af sympatiske autonome neuroner vist med grønt).
Den primære antistofkontrol er specifik for hvert nyt antistof og kan ikke gentages for hvert eksperiment. Den sekundære antistofkontrol er designet baseret på det primære antistof, der anvendes i eksperimentet, og er inkluderet i hvert forsøg. Mærkningskontrollen er inkluderet, hvis en tilstand af proceduren ændres, prøven ændres, eller når der findes en uventet mærkning.
De to vigtigste anvendelser af ICC er Radio Immuno – Assay (RIA) og Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA). Det mest almindelige anvendte antistof er immunoglobulin G.
Hvad er immunhistokemi (IHC)?
I immunhistokemi indeholder kildeprøven monoklonale og polyklonale antistoffer for at bestemme tilstedeværelsen af antigener i fremmede celler. Denne teknik er baseret på den specifikke reaktion af antigen-antistofbinding. De antistoffer, der anvendes til påvisning, kan mærkes med forskellige markører; de kan være fluorescensmarkører, radiomærkede markører eller kemiske markører. Ved at lette in vitro-binding mellem antigenet og det målrettede antistof kan tilstedeværelsen eller fraværet af et bestemt protein i en celle bestemmes.
Figur 02: Immunhistokemisk farvning af normal nyre med CD10
I øjeblikket er forskere involveret i at udvikle målantistoffer for specifikke antigener, der er til stede i celler, der enten kan udvikle sig som maligne tumorceller eller antigener, der er til stede i infektiøse agenser såsom HIV.
Hvad er lighederne mellem immuncytokemi og immunhistokemi?
- Reaktionerne er meget specifikke og nøjagtige i ICC og IHC.
- Anvendelserne af ICC og IHC omfatter diagnostik af cancer og infektionssygdomme.
- Sterile forhold bør opretholdes under begge forhold, og de bør udføres in vitro
- Begge teknikker giver reproducerbare resultater.
- Begge er hurtige.
- Radiomærkning, fluorescensteknikker bruges som detektionsmetoder i både ICC og IHC.
- Begge er baseret på antigen-antistof-parring.
Hvad er forskellen mellem immuncytokemi og immunhistokemi?
Immunocytokemi (ICC) vs Immunohistokemi (IHC) |
|
| ICC bruger primære og sekundære antistofbundne markører såsom fluorescerende markører eller enzymer og er en kraftfuld detektionsmetode til at påvise antigener, der er til stede på målceller. | IHC er en metode, der bruger monoklonale og polyklonale antistoffer til at bestemme tilstedeværelsen af antigener, som er specielle proteinmarkører placeret på celleoverfladerne. |
| Eksempelkilde | |
| Prøver afledt af væv, der er blevet histologisk behandlet til tynde sektioner, bruges i ICC. | IHC bruger prøver, der består af celler dyrket i et monolag eller celler i suspension, som deponeres på et objektglas. |
| Eksempelbehandling | |
| I ICC skal celler være permeable for at lette antistofpenetration til de intracellulære mål. | I IHC er cellerne formalinfikserede, paraffinindlejrede før farvning. |
Opsummering – Immuncytokemi vs immunhistokemi
Molekylær diagnostik bruges til at identificere og bekræfte forekomsten af både ikke-smitsomme sygdomme og overførbare sygdomme baseret på de molekylære markører, der findes på celler. Molekylære markører kan være proteiner eller sekvenser af DNA eller RNA; udvikling af teknologier som ICC og IHC har banet vejen for, at forskere kan identificere sygdommen og dens årsag på et tidligt tidspunkt. Både ICC og IHC afhænger af de specifikke reaktioner mellem antistof og antigen, selvom prøvekilden. Den største forskel mellem immuncytokemi og immunhistokemi er prøvebehandlingen af de to procedurer.
Download PDF-version af immuncytokemi vs immunhistokemi
Du kan downloade PDF-versionen af denne artikel og bruge den til offline-formål i henhold til citatnotat. Download venligst PDF-versionen her Forskel mellem immuncytokemi og immunhistokemi.
