Nøgleforskellen mellem flowcytometri og immunhistokemi er, at flowcytometri er en teknik, der bruger en laserstråle til at detektere og måle fysiske og kemiske karakteristika for en population af celler eller partikler, mens immunhistokemi er en teknik, der bruger monoklonal og polyklonale antistoffer til påvisning af specifikke antigener i væv.
Flowcytometri og immunhistokemi er to teknikker, der bruges til at diagnosticere sygdomme, især kræftformer. Flowcytometri anvender en laserstråle til at karakterisere cellernes fysiske og kemiske egenskaber. Immunhistokemi anvender monoklonale og polyklonale antistoffer til påvisning af specifikke antigener i vævssnit.
Hvad er flowcytometri?
Flowcytometri er en populær teknik inden for cellebiologi. Denne teknik detekterer og måler de fysiske og kemiske egenskaber af en cellepopulation. Flowcytometri er meget udbredt inden for områderne immunologi, molekylærbiologi, bakteriologi, virologi, cancerbiologi og overvågning af infektionssygdomme. Den bruger en laser som lyskilde til at tælle, sortere og profilere celler i en væskeblanding. Derfor giver det en hurtig multiparametrisk analyse af celler i en løsning.
Figur 01: Flowcytometri
Denne teknik begynder med at injicere en celleprøve i flowcytometeret. Flowcytometer har tre kernesystemer: fluidik (en flowcelle), optik (forskellige filtre, lysdetektorer og lyskilde) og elektronik (flowcytometerinstrumentering). Inden da skal prøven behandles med specifikke farvestoffer afhængigt af de celler, der analyseres. Derfor anvender den en række forskellige fluorescerende reagenser såsom fluorescerende konjugerede antistoffer, DNA-bindende farvestoffer, levedygtighedsfarvestoffer, ionindikatorfarvestoffer og fluorescerende ekspressionsproteiner osv. Dette instrument tillader flow af én celle ad gangen gennem laserstrålen. Når lys spredes gennem cellen og dens komponenter, udsender det bånd med forskellige bølgelængder. På denne måde kan titusindvis af celler hurtigt undersøges, og de indsamlede data behandles af en computer.
Hvad er immunhistokemi?
Immunohistokemi er en teknik, der anvender monoklonale og polyklonale antistoffer til at bestemme vævsfordelingen af et antigen af interesse. Det er en almindelig teknik inden for histopatologi. Det er en mikroskopi-baseret, immunfarvningsteknik. Denne teknik letter den selektive identifikation og lokalisering af antigener i celler i et væv baseret på den specifikke binding med fluorescensmærkede antistoffer. Denne teknik er meget udbredt til diagnosticering af cancere, da specifikke tumorantigener udtrykkes de novo eller opreguleres i visse cancerformer. Denne teknik er meget nyttig til at forudsige terapeutisk respons i to vigtige tumorer, dvs. carcinom i brystet og prostata. Ud over sygdomsdiagnostik anvendes immunhistokemi inden for lægemiddeludvikling og biologisk forskning. Desuden er immunhistokemi nyttig ved påvisning og bekræftelse af infektiøse agenser i væv.
Figur 02: Immunhistokemi
Denne teknik kræver biopsier, og de bearbejdes til sektioner med en mikrotom, og derefter inkuberes sektionerne med et passende antistof. Bindingsstederne for antigen-antistoffer visualiseres under lys- eller fluorescerende mikroskop.
Hvad er lighederne mellem flowcytometri og immunhistokemi?
- Flowcytometri og immunhistokemi er to teknikker, der bruger fluorescensmærkede antistoffer.
- Begge teknikker kan detektere antigener på celleoverfladen eller inde i celler.
- Derfor gør begge teknikker det muligt at opdage sygdomme, specifikt infektionssygdomme og kræft.
Hvad er forskellen mellem flowcytometri og immunhistokemi?
Flowcytometri er en laserbaseret teknik, der detekterer og måler de fysiske og kemiske karakteristika af en cellepopulation. Immunhistokemi er en mikroskopi-baseret teknik, der muliggør selektiv identifikation og lokalisering af antigener i celler i et væv. Så dette er den vigtigste forskel mellem flowcytometri og immunhistokemi. Desuden bruger flowcytometri en laserstråle, mens immunhistokemi har brug for antistoffer. Flowcytometer er det vigtigste instrument, der kræves i flowcytometri, mens immunhistokemi har brug for et lys- eller fluorescerende mikroskop.
Nedenfor er en oversigt over forskellen mellem flowcytometri og immunhistokemi i tabelform.
Opsummering – Flowcytometri vs immunhistokemi
Flowcytometri har brug for et flowcytometer, mens immunhistokemi har brug for et almindeligt eller fluorescerende mikroskop. Desuden bruger flowcytometri en laserstråle, mens immunhistokemi anvender monoklonale og polyklonale antistoffer. Derudover er omkostningerne ved immunhistokemi relativt lave sammenlignet med flowcytometri. Dette er således opsummeringen af forskellen mellem flowcytometri og immunhistokemi. Begge teknikker er nyttige til diagnosticering af sygdomme som kræft og infektionssygdomme.
