Nøgleforskellen mellem gel- og papirelektroforese er, at separationsmediet ved gelelektroforese er agarosegel, hvorimod separationsmediet ved papirelektroforese er en papirstrimmel nedsænket i en bufferopløsning.
Elektroforese er en analytisk teknik, der er nyttig til at analysere en prøve ved hjælp af de elektriske egenskaber af de kemiske arter, der er til stede i prøven. Her kan vi observere bevægelsen af det dispergerede opløste stof i det analyserede medium. Derfor kan vi bestemme bevægelsen af den kemiske art i forhold til mediet. Gelelektroforese og papirelektroforese er to vigtige teknikker inden for kemi.
Hvad er gelelektroforese?
Gelelektroforese kan beskrives som en metode til separation og analyse af makromolekyler afhængigt af størrelsen og ladningen. Makromolekyler i denne sammenhæng kan referere til DNA, RNA, proteiner og deres fragmenter. Denne metode er nyttig i klinisk kemi til adskillelse af proteiner efter ladning eller størrelse. Derudover er det vigtigt i biokemi og molekylærbiologi for adskillelse af en blandet population af DNA- og RNA-fragmenter efter deres længde at estimere størrelsen af DNA- og RNA-fragmenter. Desuden kan vi bruge det til at adskille proteiner efter deres ladning.
Figur 01: Gelelektroforeseinstrumentering
Vi kan adskille nukleinsyremolekyler ved at anvende et elektrisk felt til bevægelse af negativt ladede molekyler gennem en matrix af agarose eller andre stoffer. I denne proces kan kortere molekyler bevæge sig hurtigere, mens længere molekyler bevæger sig langsommere. Dette skyldes, at kortere molekyler nemt kan bevæge sig gennem gelporerne. Vi kalder denne bevægelse af fragmenter gennem porer "sigtning". Desuden kan vi norm alt ikke adskille proteiner efter deres størrelse fra denne metode, fordi proteiner er for store til at blive sigtet fra gelporerne. Vi kan dog bruge denne proces til at adskille nanopartikler.
Hvad er papirelektroforese?
Papirelektroforese kan beskrives som adskillelse ved hjælp af filterpapir, der er gennemblødt i bufferopløsning. Generelt bruger vi diethylbarbitursyre og barbitursyre opløst i alkali som bufferopløsning. pH-værdien af denne bufferopløsning er pH 8,6. Desuden kan vi placere en lille mængde serum på papiret, og der føres en jævnstrøm igennem det i flere timer.
Papirelektroforese er vigtig for adskillelsen af små, ladede molekyler, herunder aminosyrer og små proteiner. Her skal vi fugte en strimmel filterpapir med buffer og nedsænke enderne af strimlen i bufferreservoirer, der indeholder elektroder. Den første person, der rapporterede, der brugte denne metode, var Konig i 1937. I sine resultater introducerede han en papirgennemvædet buffer til zoneelektroforese og foreslog også UV-detektion.
Hvad er forskellen mellem gel- og papirelektroforese?
Elektroforese er en analytisk teknik, der er nyttig til at analysere en prøve ved hjælp af de elektriske egenskaber af de kemiske arter, der er til stede i prøven. Gelelektroforese og papirelektroforese er to vigtige elektroforesemetoder. Den vigtigste forskel mellem gel- og papirelektroforese er, at separationsmediet i gelelektroforese er agarosegel, hvorimod separationsmediet ved papirelektroforese er en papirstrimmel nedsænket i en bufferopløsning.
Nedenfor er en oversigt over forskellen mellem gel- og papirelektroforese i tabelform til sammenligning side om side.
Opsummering – Gel vs papirelektroforese
Gelelektroforese er metoden til separation og analyse af makromolekyler afhængigt af størrelsen og ladningen, mens papirelektroforese er adskillelsen ved hjælp af filterpapir-trips gennemvædet i bufferopløsning. Den vigtigste forskel mellem gel- og papirelektroforese er, at separationsmediet i gelelektroforese er agarosegel, hvorimod separationsmediet ved papirelektroforese er en papirstrimmel nedsænket i en bufferopløsning.
